如何選擇適合實(shí)驗(yàn)的 QIAGEN 質(zhì)粒試劑盒？—— 全維度選擇指南

更新時(shí)間：2025-11-13

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選擇 QIAGEN 質(zhì)粒試劑盒需圍繞實(shí)驗(yàn)規(guī)模、DNA 質(zhì)量需求、操作效率、質(zhì)粒特性四大核心維度，結(jié)合具體實(shí)驗(yàn)參數(shù)（如培養(yǎng)體積、目標(biāo)產(chǎn)量、下游應(yīng)用）精準(zhǔn)匹配。以下為分步驟選擇邏輯及關(guān)鍵參考依據(jù)：

一、第一步：根據(jù) “實(shí)驗(yàn)規(guī)模" 定基礎(chǔ)規(guī)格（核心：培養(yǎng)體積 + 目標(biāo)產(chǎn)量）

實(shí)驗(yàn)規(guī)模直接決定試劑盒的 “規(guī)格等級(jí)"（小規(guī)模 / 中規(guī)模 / 大規(guī)模），需先明確單次實(shí)驗(yàn)的細(xì)菌培養(yǎng)體積和所需質(zhì)粒產(chǎn)量，對(duì)應(yīng)不同試劑盒系列：

1. 小規(guī)模實(shí)驗(yàn)（培養(yǎng)體積≤10ml，產(chǎn)量≤50µg）

適合場(chǎng)景：快速驗(yàn)證（如克隆篩選、酶切驗(yàn)證）、小批量預(yù)實(shí)驗(yàn)、高通量樣本處理（96 孔板）。可選試劑盒及關(guān)鍵參數(shù)對(duì)比：

試劑盒類型	培養(yǎng)體積（3-4×10? cells/ml）	目標(biāo)產(chǎn)量	操作時(shí)間	核心優(yōu)勢(shì)	下游適配場(chǎng)景
QIAGEN Plasmid Mini Kit	3ml	≤20µg	80min	轉(zhuǎn)染級(jí)純度，適配 QIAcube 自動(dòng)化	小規(guī)模轉(zhuǎn)染、體外轉(zhuǎn)錄
QIAprep Spin Miniprep Kit	1-5ml	5-50µg	30min	分子生物學(xué)級(jí)，快速離心操作	常規(guī)克隆、測(cè)序
Quicklyse Miniprep Kit	1-3ml	8-15µg	9min	超快速（9 分鐘完成），測(cè)序級(jí)	緊急篩選、高通量測(cè)序
96 孔板系列（如 QIAprep 96 Turbo）	1-5ml / 孔	4-20µg / 孔	45min	適配 BioRobot 自動(dòng)化，高通量	96 樣本同步處理

2. 中規(guī)模實(shí)驗(yàn)（培養(yǎng)體積 25-500ml，產(chǎn)量 100-500µg）

適合場(chǎng)景：常規(guī)實(shí)驗(yàn)室批量制備（如多次轉(zhuǎn)染、測(cè)序文庫(kù)構(gòu)建、蛋白表達(dá)模板）。可選試劑盒及關(guān)鍵參數(shù)對(duì)比：

規(guī)格等級(jí)	推薦試劑盒	培養(yǎng)體積（高 / 低拷貝）	目標(biāo)產(chǎn)量（高拷貝）	操作時(shí)間	核心優(yōu)勢(shì)
Midi	QIAGEN Plasmid Midi Kit	25ml（高）/100ml（低）	75-100µg	150min	轉(zhuǎn)染級(jí)，重力流操作，穩(wěn)定
Midi	QIAfilter Plasmid Midi Kit	25ml（高）/100ml（低）	75-100µg	120min	過(guò)濾澄清（替代離心），更快
Maxi	QIAGEN Plasmid Maxi Kit	100ml（高）/500ml（低）	300-500µg	160min	中通量轉(zhuǎn)染首-選，適配低拷貝
Maxi	HiSpeed Plasmid Maxi Kit	150-250ml（高）	300-750µg	80min	超快速（比常規(guī)快 50%），轉(zhuǎn)染級(jí)	緊急批量轉(zhuǎn)染

3. 大規(guī)模實(shí)驗(yàn)（培養(yǎng)體積≥500ml，產(chǎn)量≥1mg）

適合場(chǎng)景：大量質(zhì)粒儲(chǔ)備（如動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、基因治療研究、工業(yè)級(jí)制備）。可選試劑盒及關(guān)鍵參數(shù)對(duì)比：

規(guī)格等級(jí)	推薦試劑盒	培養(yǎng)體積（高 / 低拷貝）	目標(biāo)產(chǎn)量（高拷貝）	操作注意事項(xiàng)
Mega	QIAGEN Plasmid Mega Kit	500ml-2.5L（高），不推薦低拷貝	≤2.5mg	可配 QIAfilter 過(guò)濾組件，真空澄清
Mega	EndoFree Plasmid Mega Kit	500ml-2.5L（高）	≤2.5mg	無(wú)內(nèi)毒素（≤0.1EU/µg），基因治療用
Giga	QIAGEN Plasmid Giga Kit	2.5-5L（高），不推薦低拷貝	≤10mg	需配合中央真空系統(tǒng)，適合大規(guī)模生產(chǎn)
Giga	QIAfilter Plasmid Giga Kit	2.5-5L（高）	≤10mg	過(guò)濾澄清，減少離心步驟耗時(shí)

二、第二步：根據(jù) “下游應(yīng)用" 定 DNA 質(zhì)量等級(jí)（核心：純度 / 內(nèi)毒素要求）

不同下游實(shí)驗(yàn)對(duì) DNA 純度（如蛋白殘留、內(nèi)毒素）要求差異極大，需根據(jù)實(shí)驗(yàn)類型明確 “質(zhì)量等級(jí)"，排除不符合的試劑盒：

下游實(shí)驗(yàn)類型	核心質(zhì)量要求	推薦試劑盒系列	需規(guī)避的試劑盒
真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染（尤其是敏感細(xì)胞）	轉(zhuǎn)染級(jí)純度（無(wú)蛋白 / RNase）、低內(nèi)毒素（≤10EU/µg）	QIAGEN Plasmid Kits、QIAfilter Kits	僅分子生物學(xué)級(jí)的 QIAprep Spin/Quicklyse
基因治療、動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)	無(wú)內(nèi)毒素（≤0.1EU/µg）	EndoFree Plasmid Kits	常規(guī) Plasmid Kits、HiSpeed Kits
體外轉(zhuǎn)錄、PCR 擴(kuò)增	無(wú) RNase 殘留、高純度	QIAGEN Plasmid Kits（Mini/Midi）	未去除 RNase 的快速試劑盒
常規(guī)克隆、酶切驗(yàn)證	分子生物學(xué)級(jí)純度	QIAprep Spin、Quicklyse	高成本的 EndoFree/Mega 系列
BAC/PAC/P1 大構(gòu)建體提取	適配大片段（150-250kb）	QIAGEN Large-Construct Kit	常規(guī) Mini/Midi Kit（片段易斷裂）

三、第三步：根據(jù) “操作效率" 匹配流程需求（核心：時(shí)間 + 自動(dòng)化）

若實(shí)驗(yàn)有 “時(shí)效性需求"（如緊急實(shí)驗(yàn)）或 “高通量 / 自動(dòng)化需求"（如 96 樣本同步處理），需優(yōu)先匹配操作時(shí)間短、支持自動(dòng)化的試劑盒：

1. 時(shí)間敏感型實(shí)驗(yàn)（需快速出結(jié)果）

超快速需求（≤30 分鐘）：選Quicklyse Miniprep Kit（9min）或HiSpeed Plasmid Kits（Midi/Maxi，80-100min）；

常規(guī)快速需求（30-60 分鐘）：選QIAprep Spin Miniprep Kit（30min）或QIAfilter Midi Kit（120min，過(guò)濾替代離心）。

2. 自動(dòng)化 / 高通量需求

96 孔高通量：選QIAprep 96 Plus/Turbo Miniprep Kit，適配 BioRobot Universal System 自動(dòng)化平臺(tái)，單次處理 96 樣本；

單樣本自動(dòng)化：選QIAGEN Plasmid Mini/Maxi Kit，適配 QIAcube Connect 自動(dòng)化系統(tǒng)，減少手動(dòng)操作誤差。

四、第四步：根據(jù) “質(zhì)粒特性" 優(yōu)化選擇（核心：拷貝數(shù) + 片段大小）

質(zhì)粒的拷貝數(shù)（高 / 低 / 極低）和片段大小（常規(guī)質(zhì)粒 / BAC / 黏粒）會(huì)影響試劑盒的 “適配性"，需針對(duì)性選擇：

1. 按 “質(zhì)粒拷貝數(shù)" 調(diào)整

高拷貝質(zhì)粒（如 pUC、pBluescript，拷貝數(shù) 300-1000）：幾乎適配所有規(guī)格，優(yōu)先選常規(guī)系列（如 Plasmid Mini/Midi），無(wú)需額外擴(kuò)增，推薦用LB 培養(yǎng)基（避免 TB/2xYT 等 rich 培養(yǎng)基，易導(dǎo)致雜質(zhì)增多）；

低拷貝質(zhì)粒（如 pBR322、pACYC，拷貝數(shù) 10-20）：需選 “支持低拷貝" 的規(guī)格，如Plasmid Midi（100ml 培養(yǎng)）、Plasmid Maxi（500ml 培養(yǎng)），可添加 170mg/L 氯霉素?cái)U(kuò)增拷貝數(shù)，擴(kuò)增后按高拷貝體積選擇；

極低拷貝質(zhì)粒（如 pSC101，拷貝數(shù)≤5）：僅推薦Plasmid Maxi（500ml 培養(yǎng)）、Plasmid Mega（2.5L 培養(yǎng)），需配合 “極低拷貝專用 protocol"（額外異丙醇沉淀步驟），避免用 Giga 規(guī)格（不推薦低拷貝）。

2. 按 “質(zhì)粒片段大小" 調(diào)整

常規(guī)質(zhì)粒（≤10kb）：所有系列均適配；

黏粒（35-50kb）：選Plasmid Maxi/Mega，產(chǎn)量可達(dá) 400µg（Maxi）、2.5mg（Mega）；

BAC/PAC/P1（150-250kb）：僅推薦QIAGEN Large-Construct Kit，含 exonuclease buffer 去除基因組 DNA 污染，常規(guī)試劑盒易導(dǎo)致大片段斷裂。

五、第五步：核對(duì) “細(xì)節(jié)參數(shù)" 排除沖突（核心：洗脫體積 + 結(jié)合容量）

最后需確認(rèn)試劑盒的 “細(xì)節(jié)參數(shù)" 是否匹配實(shí)驗(yàn)需求，避免因小參數(shù)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)受阻：

洗脫體積：若需高濃度 DNA（如顯微注射），選洗脫體積小的試劑盒（如 QIAprep Spin Miniprep Kit，固定 50µl）；若需大體積稀釋，選洗脫體積可變的系列（如 Plasmid Mini Kit，推薦 50µl，可調(diào)整）；

結(jié)合容量：避免 “過(guò)載"—— 如目標(biāo)產(chǎn)量 30µg，不可選結(jié)合容量≤20µg 的 Plasmid Mini Kit，需選 QIAprep Spin（結(jié)合容量 50µg）；

配套試劑：若需 “無(wú)內(nèi)毒素處理"，優(yōu)先選 EndoFree 系列（自帶內(nèi)毒素去除緩沖液），而非常規(guī)系列 + 額外補(bǔ)充協(xié)議（成本更高）。

流程圖解

通過(guò)以上五步，可精準(zhǔn)匹配實(shí)驗(yàn)需求與試劑盒特性，避免 “選貴不選對(duì)" 或 “規(guī)格不足導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗"。若仍有疑問(wèn)，可聯(lián)系 QIAGEN 代理商——柏萊源（天津）生物科技有限公司，獲取更詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)資料！